Бифидогенное действие Лактусана

1. 1. В экспериментах in vitro изучить влияние препаратов с лактуло­зой на рост бифидобактерий.

1. 1. В экспериментах in vitro изучить влияние препаратов с лактуло­зой на развитие популяций убиквитарных микроорганизмов.

1. 1. Исследование цитопатогенного действия препаратов с лактулозой на модели культуры клеток.

1. В экспериментах in vitro изучение влияние препаратов, содержа­щих лактулозу, на ферментативную активность лизоцима.

В работе использованы препараты:

• «Лактофан»;
• «Бифидофан»;
• «Лактусан»;
• «Лактовит»;

чистые культуры микроорганизмов:

• Bifidobacterium bifidum;
• Staphylococcus aureus;
• Staphylococcus epidermidis;
• Escherichia coli;
• Pseudomonas aeruginosa;
• Bacillus subtilis;
• Bacterium cereus;
• Lactobacillus plantarum;
• бактерии рода Proteus;
• Candida albicans;

искусственные питательные среды:

• среда Эндо;
• мясопептонный агар;
• молочно-желточно-солевой агар;
• кровяной агар;
• среда Блаурокка;
• среда Сабуро;
• мясопептонный бульон.

Изучение развития популяций микроорганизмов проводилось с использованием методов количественных посевов и турбидиметрического метода, интенсивность роста оценивали по изменению мутности взвеси и определения КОЕ на мл.

В работе использованы полуперевиваемые культуры клеток:

• Нер-2 – культура клеток эпителиальной карциномы человека
• RD – культура клеток рабдомиосаркомы человека.

Лизоцимная активность определялась нефелометрическим методом по отношению к культуре Micrococcus luteus методом, разрабо­танным О.В. Бухариным (1992).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В культуральную среду вносили изучаемые препараты в концентрации 10 процентов, изучаемые микроорганизмы за­севались в количестве 0,1 мл 2 млд. взвеси бактерий от­дельных видов, посевы инкубировали при 37С, в контрольный образцах отсутствовали препараты лактулозы. Интенсивность развития бактериальных популяций оценивали фотонефелометрическим методом по степени изменения мутности 24 часовой культуры.

Добавление в среду «Бифидофана» в наибольшей степени повышало интенсивность развития бифидобактерий, что может быть связано с увеличением посевной дозы. Мутность взвеси увеличивалась до 0,96 при значениях в контроле – 0,41. Наряду с этим, в присутствии «ЛАКТОФАНА», «ЛАКТУСАНА» и «ЛАКТОВИТА» наблюдалось увеличение интенсивности разви­тия популяции бифидо- и лактобактерий (показатели мутности взвеси составляли соответственно 0,72, 0,64, 0,83).

Таким образом, лактулоза изученных препаратов облада­ет способностью увеличивать интенсивность развития популя­ций бифидо- и лактобактерий, «Бифидофан» обладает более выра­женным бифидогенным действием.

Установлено, что «ЛАКТОФАН» снижает интенсивность раз­вития популяции S.aureus (показатель мутности 0,47, в контро­ле – 1,45), микроорганизмов рода Proteus (в опыте – 0,06, в контроле – 0,15), Ps. aeruginosa (в опыте – 0,1, в контроле – 0,15), грибов рода Candida (в опыте – 0.14, в контроле – 0,16). Повышает интенсивность размножения Е.coli (в опыте показатель мутности – 0,17, в контроле – 0,1).

«Бифидофан» увеличивает интенсивность размножения кишечной палочки (соответственно от 0,1 до 1,2) и снижает ин­тенсивность развития популяций стафилококка, микроорганизмов рода Proteus и грибов рода Candida.

«ЛАКТУСАН» не изменяет интенсивность развития Е.coli и существенно уменьшает интенсивность роста грибов рода Candida, стафилококков и протея.

«ЛАКТОВИТ» увеличивает развитие кишечной палочки (мутность культуры – 0,41, в контроле – 0,18), снижает рост стафилококков (0,26 в опыте, 1,45 – в контроле), микроорга­низмов рода Proteus (в опыте – 0,4, в контроле – 1,01).

Таким образом, интенсивность развития условно-патогенных микроорганизмов в присутствии изученных препаратов лактулозы существенно умень­шается, что может иметь практическое значение в направленной нормализации микрофлоры кишечника при дисбактериозах с по­мощью данных препаратов лактулозы. Использование данных препа­ратов может позволить увеличить в кишечнике число кишечных палочек и уменьшить интенсивность размножения патогенных мик­роорганизмов.

Характер действия был однотипен при изучении всех четырех препаратов:

• при добавлении препаратов в культуральную среду существен­ного изменения монослоя культуры клеток не наблюдалось;
• через 24 часа наблюдалось изменение цвета среды за счет из­менения реакции среды в кислую сторону при добавлении препара­тов «БИФИДОФАНА» и «ЛАКТОФАНА». Морфологических изменений монослоя клеток не наблюдалось.

Таким образом, препараты лактулозы не обладают цитопатическим и цитотоксическим действием.

Изучена лизоцимная активность коммерческого препарата «лизоцима» в присутствии различных концентраций препаратов (5%, 10%, 15%, 20%). Установлено, что препараты в концентрации 5% повышают ферментативную активность лизоцима. Более активен в этом отношении «БИФИДОФАН». Повышение концентрации препаратов до 10–15% не влияет на лизоцимную активность, увеличение кон­центрации до 20% снижает активность фермента.

1. 1. Препараты лактулозы повышают интенсивность развития популяции бифидобактерий in vitro.

1. 1. Рост и размножение популяции лактобактерий в присут­ствии препаратов лактулозы увеличиваются.

1. 1. Препараты лактулозы увеличивают интенсивность размножения популяции Е.соli.

1. 1. В присутствии препаратов лактулозы снижается интен­сивность развития стафилококков, грибов рода Candida, микроор­ганизмов рода Proteus и Ps.aeruginosa.

1. 1. Препараты лактулозы не обладают цитопатическим дейст­вием.

1. 1. В присутствии препаратов лактулозы усиливается фер­ментативная активность лизоцима, отмечается дозозависимый эф­фект.

1. 1. Активность препаратов различна. Более выраженный бифидогенный эффект, увеличение интенсивности роста Е.соli, подавление развития убиквитарных бактерий, усиление фермен­тативной активности лизоцима наблюдаются у препаратов «БИФИДОФАНА» и «ЛАКТОВИТА».

1. Препараты «ЛАКТУСАН», «БИФИДОФАН», «ЛАКТОВИТ», «ЛАКТОФАН» могут быть использованы для лечения дисбиотических сдвигов в составе микрофлоры организма, в нормализации аутомикрофлоры, для усиления антагонистической активности пред­ставителей нормальной микрофлоры против патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, повышают неспецифическую резистентность организма, усиливая активность лизоцима.

Профессор кафедры микробиологии с иммунологией и вирусологией
Ярославской государственной медицинской академии
доктор медицинских наук,

член-корр. РАЕ